Catalog_no	BF06202-100
Product_name	慢病毒滴度快速檢測(cè)卡(病毒包裝專用)
Size	100個(gè)/包
Category	病毒包裝試劑
Price	4220.00
應(yīng)用	檢測(cè)范圍約為0-3000ng（具體以批次報(bào)告為準(zhǔn)）

說(shuō)明:本類型檢測(cè)卡檢測(cè)范圍約為:0-3000ng(本檢測(cè)數(shù)據(jù)僅供參考，具體產(chǎn)品情況請(qǐng)參考相關(guān)批次檢測(cè)報(bào)告)

一、原理

 

 

       本產(chǎn)品是基于膠體金側(cè)向?qū)游黾夹g(shù)的HIV-1 P24蛋白半定量檢測(cè)卡，可以用于相關(guān)慢病毒載體和假病毒包裝效率的快速評(píng)估（P24蛋白是慢病毒外殼中含量*大的標(biāo)志性蛋白）。檢測(cè)卡由層析膜、樣品墊、金標(biāo)墊、層析膜、吸水紙、背板等結(jié)構(gòu)組成。在層析膜上固定有羊抗鼠多克隆抗體（質(zhì)控線）和P24鼠單克隆抗體（檢測(cè)線）；在金標(biāo)墊上固定有膠體金標(biāo)記的另外一株P(guān)24鼠單克隆抗體。待測(cè)樣品滴加到樣品墊，通過(guò)毛細(xì)作用泳向金標(biāo)墊，到達(dá)金標(biāo)墊后，樣品中的P24蛋白與金標(biāo)墊鼠抗P24單克隆抗體結(jié)合形成復(fù)合物。復(fù)合物移動(dòng)到檢測(cè)線時(shí)，被檢測(cè)線上的另一株P(guān)24鼠單克隆抗體所捕獲。隨著被捕獲的復(fù)合物的堆積，在檢測(cè)線上呈現(xiàn)出酒紅色。當(dāng)復(fù)合物泳動(dòng)到質(zhì)控線，羊抗鼠多抗捕獲膠體金標(biāo)記的鼠單克隆抗體，呈現(xiàn)酒紅色。通過(guò)判讀層析膜上檢測(cè)線和質(zhì)控線是否顯色，判斷樣品中是否存在P24抗原。當(dāng)樣品中P24濃度變化時(shí)，檢測(cè)線顏色的深淺與P24濃度呈正相關(guān)，通過(guò)與比色卡比較，可以半定量待檢標(biāo)本中P24蛋白濃度，并大致估算慢病毒的滴度。

 

 

 

二、用途

1.基于HIV-1的慢病毒載體包裝效率檢測(cè)：傳統(tǒng)的慢病毒包裝效率檢測(cè)的方法有ELISA法（檢測(cè)P24蛋白含量）和Real-time PCR法（檢測(cè)核酸拷貝數(shù)），這兩種方法都耗時(shí)費(fèi)力，且成本高。本產(chǎn)品使用簡(jiǎn)便，檢測(cè)時(shí)間短，可以隨時(shí)對(duì)轉(zhuǎn)染效果進(jìn)行評(píng)估。如在更換培養(yǎng)基時(shí)，吸取樣品滴加到試紙上，10-15min后即可判讀結(jié)果。因此，使用本快速檢測(cè)試紙，可以快速評(píng)估轉(zhuǎn)染效果。

2.基于HIV-1的假病毒包裝效率檢測(cè)：同樣含有P24蛋白，在轉(zhuǎn)染后，可以使用本檢測(cè)卡對(duì)包裝效果進(jìn)行快速評(píng)估。

 

          

圖1. 檢測(cè)卡顯色樣式

 

 

 

 

圖2. 比色卡

 

 

 

*一個(gè)慢病毒顆粒（Lentiviral Particle, LP）中約有2000個(gè)P24蛋白分子，用以下公式可以計(jì)算慢病毒載體的顆粒數(shù)（LP）：

一個(gè)LP相當(dāng)于：2000×24×103/(6×1023)g of P24=8×10-5 pg of P24；或者說(shuō)，1ng P24=1.25×107 LPs（≈1.25×104-5 TU**）

**正常情況下，每100-1000 LPs中會(huì)有1個(gè)具有感染活性的病毒載體，即1 TU（Transducing Unit）。

注意：上述公式計(jì)算得到的LP值是理論值，檢測(cè)樣品中含有的游離的P24蛋白可能會(huì)使該值偏高。 

提示：通常上清中病毒含量需要超過(guò)106 TU/ml，才能確保濃縮純化后得到足夠濃度的慢病毒載體（一般能濃縮150倍左右）。